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科技服務 新物種均一化cDNA文庫測序
轉錄組層次研究服務-新物種均一化cDNA文庫測序

均一化cDNA文庫是指某一特定組織或細胞的所有表達基因均包含其中,且在cDNA文庫中表達基因對應的cDNA的拷貝數相等或接近。構建均一化的cDNA文庫的主流方法是基于基因組DNA在拷貝數上具有相對均一化的性質,通過cDNA與基因組DNA飽和雜交而降低在文庫中高拷貝存在的cDNA的豐度;均一化處理后文庫的高豐度表達 cDNA 是處理前的0。3%~2。5%,基本滿足節約篩選的要求。

 

均一化cDNA文庫具有以下4方面的優點:

1) 在經濟上具有廣泛的應用空間,可以節約大量試驗成本。

2) 增加克隆低豐度mRNA的機會,適用于分析各種發育階段或各種組織的基因表達及突變檢測。

3) 與原始豐度的mRNA拷貝數相對應的cDNA探針與均一化的cDNA文庫作雜交,可以估計出大多數基因的表達水平及發現一些組織特異的基因。而以往的文庫構建,忽略了mRNA豐度的影響。

4) 可以用于遺傳圖譜的制作和進行大規模的原位雜交,作為優化的文庫系統還可以用于大規模的測序或芯片制作等研究。

技術優勢:
 
1. 完整性好:均一化測序可以得到大量低豐度轉錄本,獲得的轉錄本信息更加完善;
2. 延續性高:獲得的完善轉錄本信息有利于做更多后續研究;

 

3. 可靠性強:高數據量保證不同豐度的轉錄本都能準確鑒定。
 
技術優勢
 
1) 完整性好:均一化測序可以得到大量低豐度轉錄本,獲得的轉錄本信息更加完善;
2) 延續性高:獲得的完善轉錄本信息有利于做更多后續研究;
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